轉(zhuǎn)染試劑主要作用是輔助將質(zhì)粒、DNA、siRNA、miRNA或蛋白質(zhì)等外源物質(zhì)輸送到細(xì)胞內(nèi)部，目前已成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)試劑。令人擔(dān)憂的是，現(xiàn)在市面上的轉(zhuǎn)染試劑種類繁多，質(zhì)量參差不齊，那我們應(yīng)該如何選擇一款最適用于自己實驗的轉(zhuǎn)染試劑呢？
昆蟲細(xì)胞表達(dá)是一種用于產(chǎn)生具有簡單翻譯后修飾的蛋白質(zhì)的平臺。瞬時轉(zhuǎn)染和重組桿狀病毒的產(chǎn)生是昆蟲細(xì)胞表達(dá)的常用方法。TransIT-Insect是一種無動物來源的轉(zhuǎn)染試劑，專門針對各種昆蟲細(xì)胞類型的高基因表達(dá)進(jìn)行了優(yōu)化。
轉(zhuǎn)染試劑主要作用是輔助將質(zhì)粒、DNA、siRNA、miRNA或蛋白質(zhì)等外源物質(zhì)輸送到細(xì)胞內(nèi)部，目前已成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)試劑。令人擔(dān)憂的是，現(xiàn)在市面上的轉(zhuǎn)染試劑種類繁多，質(zhì)量參差不齊，那我們應(yīng)該如何選擇一款最適用于自己實驗的轉(zhuǎn)染試劑呢？
昆蟲細(xì)胞表達(dá)是一種用于產(chǎn)生具有簡單翻譯后修飾的蛋白質(zhì)的平臺。瞬時轉(zhuǎn)染和重組桿狀病毒的產(chǎn)生是昆蟲細(xì)胞表達(dá)的常用方法。TransIT®-Insect是一種無動物來源的轉(zhuǎn)染試劑，專門針對各種昆蟲細(xì)胞類型的高基因表達(dá)進(jìn)行了優(yōu)化。
產(chǎn)品性能：
★ 特殊的DNA遞送—在昆蟲細(xì)胞類型中，包括Sf9、High Five™ 和S2
圖1. 使用TransIT®-Insect高效轉(zhuǎn)染桿狀病毒基因組DNA。6孔板里進(jìn)行轉(zhuǎn)染，每孔5 x 105 Sf9細(xì)胞，質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑比例1：3，使用0.5ug表達(dá)GFP的ProGreen™桿狀病毒表達(dá)載體（AB Vector）和0.1 µg的pVL1393 轉(zhuǎn)移載體(AB Vector). (A)轉(zhuǎn)染后6天使用Zeiss S100熒光顯微鏡拍攝熒光和相位對比圖像。(B) Merge。
圖2. TransIT®-Insect的性能優(yōu)于競爭對手的轉(zhuǎn)染試劑。昆蟲細(xì)胞系（A）Sf9，（B）High Five™, 和（C）果蠅S2細(xì)胞，在96孔板中用0.1µg由hr5增強子/IE1啟動子驅(qū)動的熒光素酶表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使用指定試劑以指定試劑與DNA的比例（µl:µg）轉(zhuǎn)染。在轉(zhuǎn)染后48小時測量螢光素酶的表達(dá)。Sf9和High Five™在無血
★ 桿狀病毒產(chǎn)量高—昆蟲細(xì)胞中表達(dá)桿狀病毒的理想選擇
圖3. 使用TransIT®-Insect在High Five中的高效表達(dá)重組蛋白 。在6孔板中用2.5µg由hr5增強子/IE1啟動子驅(qū)動的GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn)High Five™ 細(xì)胞（Thermo Fisher Scientific） 。從轉(zhuǎn)染后72小時的細(xì)胞制備總可溶性細(xì)胞裂解物。通過SDS-PAGE和考馬斯藍(lán)染色分析來自100µl培養(yǎng)物的裂解物；cells alone（未轉(zhuǎn)
圖4. 使用TransIT®-Insect高效表達(dá)蛋白。昆蟲細(xì)胞系(A) Sf9，(B) High Five™和(C)果蠅S2在96孔板中轉(zhuǎn)染 0.1 ug的熒光素酶表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒的比例為2:1。在轉(zhuǎn)染后24、48和72小時三個時間點檢測熒光素酶的表達(dá)。Sf9和High Five™細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染；S2細(xì)胞置于含血清的培養(yǎng)基中。
★血清兼容—無動物來源的非脂質(zhì)體配方，
★性價比高—每次轉(zhuǎn)染所需的試劑量較低
產(chǎn)品信息：
Mirus 特色轉(zhuǎn)染試劑
·TransIT®-Insect Transfection Reagent 昆蟲細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑，用于制備高滴度桿狀病毒
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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MIR 6104 |
TransIT®-Insect Transfection Reagent |
0.4 ml |
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MIR 6100 |
TransIT®-Insect Transfection Reagent |
1 ml |
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MIR 6105 |
TransIT®-Insect Transfection Reagent |
5×1ml |
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MIR 6106 |
TransIT®-Insect Transfection Reagent |
10×1 ml |
瞬時轉(zhuǎn)染和重組桿狀病毒制備是昆蟲細(xì)胞表達(dá)常用方法，TransIT®-Insect 是一款專用于多種昆蟲細(xì)胞系的高效 DNA 轉(zhuǎn)染試劑。
部分應(yīng)用文獻(xiàn)展示：
#1：Establishment of a Pseudovirus Platform for Neuraminidase Inhibiting Antibody Analysis.International Journal of Molecular Sciences (2023) 24:2376
Cell line：sf21
#2：MicroRNA miR-274-5p Controls Melanotic Mass Formation and Developmental Growth by Regulating the Found-in-Neurons-JNK Signaling Axis in Drosophila.Preprints (2023).
Cell Type: S2
#3：Baculovirus actin-based motility drives nuclear envelope disruption and nuclear egress.Current Biology (2018).
Cell line : High Five
#4：miR-34-5p, encoded by Spodoptera frugiperda, participates in anti-baculovirus by regulating innate immunity in the insect host.International Journal of Biological Macromolecules (2022) 222:2190
Cell Type: S9